Модификация функциональных групп стрептокиназы при фотоокислении

Abstract

При фотохимическом окислении в системе, содержащей в качестве фотосенсибилизатора метиленовый синий, происходит разрушение одного остатка гистидина, стрептокиназы. Процесс модификации остатка гистидина стрептокиназы характеризуется константой скорости псевдопервого порядка 5,1 • 10-2 мин-1, близкой значению таковой при фотоокислении свободного L-гистидина, и частичной утратой активаторной функции белка. Скорость фотоокисления и фотоинактивации зависит от pH среды. Судя по результатам КД-спектроскопии и гель-хроматографии, фотоокисление в слабокислой среде приводит к изменению вторичной и третичной структур стрептокиназного белка, затрагивающему индольные группы остатков триптофана. В. слабощелочной среде выраженных изменений конформации при фотоокислении стрептокиназы не наблюдается. Фотоокисляемая имидазольная группа не играет существенной роли в проявлении специфической активности стрептокиназы и в образовании устойчивого комплекса с плазминогеном человека. Обсуждаются вопросы специфичности модификации остатков гистидина при фотоокислении.

Photochemical oxidatiton with methylene blue as photosensitizer results in the destruction of one histidine residue in the streptokinase molecule. This process is characterized by the rate constant corresponding to the modification of free L-histidine and results in partial inactivation of the protein. The rate of protein photo oxidation and photoinactivation is pH-dependent. As can be judged from the results of CD spectroscopy and gel chromatography, in weakly acidic (but not in weakly alkaline) media the reaction results in conformation changes of the streptokinase globule wehich affect the state of the protein tryptophanyl residue. It was found that the imidazole group destroyed during the photooxidation reaction is not essential either for the specific activity of streptokinase or for the formation of is stable complex with human plasminogen. The specificity of modification of the streptokinase histidine residue during the photooxidation reaction as discussed.