Использование бэтч-метода для концентрирования молокосвертывающего фермента из культуральной жидкости промышленного штамма Pleurotus ostreatus x floridanus

Abstract

Поскольку сыр является популярным молочным продуктом во всем мире, спрос на молочный коагулянт быстро растет по мере увеличения производства сыра. С целью удовлетворения растущего спроса на молочные коагулянты для сыроделия активно разрабатываются препараты молокосвертывающего фермента грибного происхождения. В настоящей работе предложен метод для концентрирования молокосвертывающего фермента из культуральной жидкости промышленного штамма Pleurotus ostreatus x floridanus. Культуральную жидкость, полученную после 14-дневного глубинного культивирования на картофельно-сахарозной среде, концентрировали с помощью бэтч-метода на ДЕАЕ-сефарозе. Полученный концентрат после добавления активатора обеспечивал формирование молочного сгустка, который по консистенции не уступал сгусткам, которые образовались с использованием импортных препаратов молокосвертывающих ферментов. Планируется дальнейшее исследование для достижения молокосвертывающей активности препарата на уровне импортных аналогов. Цель исследования – провести концентрирование препарата молокосвертывающего фермента из культуральной жидкости Pleurotus ostreatus, используя бэтч-метод с применением ДЭАЕ-сефарозы. Материал и методы. Штамм Pleurotus ostreatus х floridanus, гибрид (P. ostreatus x P. florida) 462 предоставлен Государственным научным учреждением «Институт леса НАН Беларуси». Для концентрирования молокосвертывающего препарата применялся бэтч-метод. Для сравнения молокосвертывающей активности были взяты промышленные препараты «Здоровеево kalase» (производитель Нидерланды) и «Полезная партия» (производитель Россия). Результаты и их обсуждение. При использовании бэтч-метода были получены три фракции, содержащие белки: одна из них не показала наличия молокосвертывающей активности, вторая имела следовые значения, а в третьей сконцентрировалась основная масса целевого белка. Заключение. При сравнении молокосвертывающей активности фракции, содержащей целевой белок с активатором, был получен молочный сгусток, не уступающий по качеству молочным сгусткам, образовавшимся при использовании промышленных препаратов «Здоровеево kalase» и «Полезная партия».