Розробка та оптимізація методів визначення активності інгібітора активатора плазміногену 1-го типу в плазмі крові

Abstract

Рівень інгібітора активатора плазміногену 1-го типу (plasminogen activator inhibitor, РаІ-1) є важливим показником патологічних процесів, оскільки активність та кількість цього протеїну в плазмі крові підвищується при гострому інфаркті міокарда, злоякісних новоутвореннях, цукровому діабеті та ін. Робота присвячена розробці та оптимізації методів визначення активності РаІ-1, які можуть бути впроваджені в лабораторно-клінічну практику. Запропоновано модифікацію методу COATEST PAI для визначення інгібіторної активності з використанням хромогенного субстрату плазміну S2251, за якою фрагменти бромціанового розщеплення фібриногену людини замінено на desав-фібрин бика. Розроблено метод визначення активності інгібітора РаІ-1 із використанням фібринових плівок, де фібрин водночас є стимулятором реакції активації плазміногену та субстратом. Застосування фібрину, природного субстрату плазміну, забезпечує високу специфічність методу і дозволяє уникнути перехресної реакції з іншими ензимами плазми.