Исследование роли остатков триптофана в молекуле стрептокиназы методом химической кодификации

Abstract

Инкубация стрептокиназы в системе Н2О2 — диоксан — бикарбонатный буфер, pH 8,5; приводит к окислению остатков триптофана, регистрируемому по изменению спектров поглощения и триптофановой флуоресценции. За 3 ч происходит полное окисление остатков триптофана в белке, число остатков равно четырем. Наиболее легко окисляется первый остаток триптофана, при этом активность стрептокиназы падает на 50%. Модификация еще одного остатка приводит к полной инактивации стрептокипазы. Значения констант скорости окисления первого, двух первых, а также третьего и четвертого остатков триптофана в молекуле стрептокиназы равны соответственно 1,5•10-2, 1,1•10-2 и 0,5•10-2 мин-1. Полное окисление остатков триптофана ведет к утрате способности стрептокиназы образовывать устойчивые эквимолярные комплексы с плазминогеном человека, однако не вызывает, судя по спектрам КД, разрушения вторичной структуры. Обсуждаются вопросы специфичности окисления остатков: триптофана в белке. Сделано заключение о важности легко окисляемых остатков триптофана для функции стрептокиназы.